Исследование влияния гормона роста (ГР) на здоровых молодых мужчин и женщин в зависимости от применяемой дозы. Целью нашего исследования было выявление различных эффектов на организм при краткосрочной терапии ГР при различных дозах рекомбинантного гормона роста человека (rhGH) (1.25, 2.5, 5.0, 10.0, и 20.0 мкг/кг в день, в течение 4 дней) на инсулиноподобный фактор роста 1 (IGF-1) и инсулиноподобный фактор, связывающий фактор роста (IGFBP-3)у мужчин и женщин, не имеющих проблем со здоровьем. Доза 1.25 мкг/кг rhGH никак не меняла уровень IGF-1. Доза 2.5 мкг/кг rhGH значительно увеличивала уровень IGF-1 у мужчин, но не у женщин (P " 0.05), тогда как более высокие дозировки увеличивали уровень у представителей обоих полов (P " 0.002). Уровень IGFBP-3 не менялся у обоих полов прив ведении доз 1.25 или 2.5 мкг/кг. Доза 5.0 мкг/кг увеличивала уровень IGFBP-3 у мужчин, но не у женщин (P " 0.05), тогда как повышение дозы до 0,02 увеличивало уровень IGFBP -3 примерно одинаково у обоих полов. В заключение вышесказанного результаты исследования показывают зависимость уровней IGF-1 and IGFBP-3 от вводимой дозы и пола реципиента. Также можно сделать вывод о том, что IGFBP-3 менее чувствителен к стимуляции организма гормоном rhGH. ГОРМОН РОСТА (ГР) главный гормон в организме человека, отвечающий за инсулиноподобный фактор роста 1 (IGF-1). Фактически уровень IGF-1 влияет на уровень выработки ГР, будучи низким при дефиците ГР и повышенным упациентов с акромегалией. Однако нарушение питания приводит к периферической резистентности к ГР, с низким уровнем IGF-1, и не устраняется повышением уровня ГР извне. В краткосрочном исследовании была предложена оценка реакции IGF-1 на экзогенное введение гормона роста. Однако тест генерации IGF-1 не определялся с точки зрения дозы гормона роста, продолжительности лечения и анализируемого периода времени, а также с точки зрения нормативных значений. В частности, до настоящего времени остается неизвестен уровень минимальной дозы ГР, влияющей на повышение выработки IGF в организме здорового молодого человека. У взрослых людей с дефицитом ГР увеличение уровня IGF-1 в период ГР-терапии наблюдалось сильнее у мужчин, чем у женщин, поэтому необходимо выяснить зависит ли этот уровень напрямую от пола здоровых молодых реципиентов. Интересно, что хотя уровни базального IGF-1 у обоих полов одинаковы, спонтанная секреция ГР в течение 24 ч явно выше у молодых женщин, чем у мужчин. Оценка нормативных реакций IGF-1 на rhGH имеет основополагающее значение для проверки возможных изменений чувствительности к ГР в течение жизни и в различных патофизиологических состояниях, таких как дефицит ГР, ожирение, недоедание, катаболические состояния, синдром Кушинга и дилатационная кардиомиопатия. Для этой цели были выделены реципиенты-мужчины в возрасте, и женщины, получающие эстрогенотерапию в постменопаузе, которая сопровождается пониженной чувствительностью к ГР. Таким образом, целью нашего исследования было определить эффект и дозу rhGH при краткосрочной терапии путем подбора различных доз и их влияния на уровень IGF-1 и IGFBP-3 у здоровых молодых людей обоих полов. В частности, мы стремились определить наименьшую дозу rhGH, способную увеличивать уровни IGF-1 и IGFBP-3. Также изучались эффекты введения rhGH на уровни ГР, инсулина, глюкозы, свободного трийодтиронина (fT3) и свободного тиоксина (fT4). Объекты и методика В исследовании приняли участие 512 мужчин и 9 женщин, молодого возраста, без проблем со здоровьем. Среди женщин исследование проводилось только в ранней фолликулярной фазу менструального цикла. Все испытуемые дали информированное согласие на участие в исследовании, которое было одобрено Этическим комитетом Туринского университета. Все испытуемые прошли шесть тестов с разными дозами rhGH (флаконы Генотропина, 4 IU 1,33 мг в 1 мл, 1,25, 2,5, 5,0, 10,0 и 20,0 мкг / кг, Pharmacia, Stockholm, Sweden) либо препаратами плацебо (0,9% солевой раствор), который вводился подкожно каждый вечер в 21:00 в течение 4 дней. Каждый тест выполнялся в случайном порядке, по крайней мере, на 1 моль друг от друга. Образцы крови для гормональных и биохимических анализов отбирались утром натощак, и через 12 часов после каждого введения rhGH. Также образец крови брался через 24 ч после последнего введения rhGH. IGF-1, IG-FBP -3, ГР, инсулин и глюкозу анализировали по каждому отбору крови. FT3 и fT4 анализировали базально и через 12 ч после последнего введения. Сывороточный IGF-1 измеряли с помощью RIA (Институт Николса) после экстракции кислотой-этанолом, чтобы избежать интерференции связывающими белками. Чувствительность анализа составляла 0,013 нмоль/л. Меж- и внутрипрофессиональные коэффициенты вариации составили 5,2-8,4% и 2,4 - 3,0% соответственно. Сывороточный IGFBP-3 измеряли с помощью RIA (Институт Николса). Чувствительность анализа составляла 0,008 нмоль/л. Меж- и внутрипрофессиональные коэффициенты вариации составили 5,3 - 6,3% и 3,4 - 8,0% соответственно. Сывороточный ГРи инсулин измеряли в двух повторах иммунорадиометрическим анализом (HGH-CTK IRMA и INSIK-5, Sorin, Saluggia, Italy). Чувствительность анализа составила 0,15 мкг/л для ГР и 2,5 мкг/л для инсулина. Интер- и интрассивные коэффициенты вариации составили 4,9-6,5% и 1,5-2,9% для ГР и 6,5-15,0% и 4,5-13,4% для инсулина, соответственно. Сыворотку fT3 и fT4 измеряли с помощью RIA (Amerlex-MAB, Johnson&Johnson Clinical Diagnostic). Чувствительность анализа составляла 0,5 пмоль/л для fT3 и 0,6 пмоль/л для fT 4. Коэффициент вариации между и внутри анализа составлял 6,5-9,8% и 3,5-5,8% для fT3 и 5,0-15,0% и 3,7-6,5% для fT4, соответственно. Уровень глюкозы в плазме определяли колориметрическим методом глюкозооксидазы (GLUCOFIX, Menarini Diagnostics, Firenze, Italy). Данные выражены либо в абсолютных значениях, либо в дополнительной области под кривой, как средство # SE. Статистический анализ данных проводили с помощью ANOVA и парного и непарного t-критерия Стьюдента. Результаты исследования Средние базальные уровни GH, IGF-1 и IGFBP-3 составляли 4,0 ± 0,8 мкг/л, 27,7 ± 0,7 нмоль/л и 101,5 ± 3,5 нмоль/л, соответственно, и существенно не различались между различными сеансами тестирования. Уровни ГР были выше у женщин, чем у мужчин (6,6 ± 2,1 против 0,5 ± 0,3 мкг / л, Р <0,001), в то время как уровни IGF-1 и IGFBP-3 не различались у обоих полов. Группы, получавшие дозу плацебо и дозу 1,25 мкг/кг rhGH не изменили уровни IGF-1 в течение всего исследования. В других группах значения существенно увеличивались через 12 часов после первого введения доз 2,5, 5,0, 10,0 и 20,0 мкг/кг rhGH (уровень IGF - 1 в 12 часов по сравнению с базальным: 28,9 ± 1,7 против 26,8 ± 1,9 , 35,6 ± 2,1 против 30,1 ± 2,1, 35,5 ± 2,0 против 28,9 ± 1,6 и 36,1 ± 2,1 против 28,8 ± 1,8 нмоль/л, соответственно). Повышение уровня IGF-1, при дозах 5,0, 10,0 и 20,0 мкг/кг rhGH были выше (Р <0,001), чем при дозе 2,5 мкг/кг rhGH. После второго, третьего и четвертого введения доз 2,5, 5,0, 10,0 и 20,0 мкг/кг rhGH уровни IGF-1 еще больше увеличивались, демонстрируя четкую связь между дозой и ответом на неё (Р 0,001). Через 24 часа после последнего введение каждой дозы rhGH, уровни IGF-1 уменьшались, но были все еще выше, чем базальные уровни (P "0,007). Дозы 1,25, 2,5 и 5,0 мкг/кг rhGH не меняли уровни IGFBP-3 на протяжении всего времени исследования. Этот уровень увеличивался после первого введения 20,0 мкг/кг (112,0 ± 7,0 по сравнению с 101,5 ± 7,0 нмоль / л, Р <0,02), но не после 10,0 мкг/кг rhGH. С другой стороны, показатель IGFBP-3 рос после второго, третьего и четвертого введения как дозы 10,0 так и 20,0 мкг/кг rhGH. Соотношение IGF-1 по сравнению с IGFBP -3 значительно увеличивалось во время лечения ГР дозой 5.0, 10.0 и 20.0 мкг/ кг в сутки. Когда данные, оцененные как изменения площади под кривой (нмоль/л 24ч) от базовой линии до 84 ч, анализировались с учетом разделения субъектов по полу, доза 2,5 мкг/кг rhGH значительно стимулирует IGF-1 у мужчин, (P <0,05), но не у женщин. Более высокие дозы увеличивали уровни IGF-1 у обоих полов (P <0,001), но IGF-1 ответы на введение доз 5,0, 10,0 и 20,0 мкг/кг rhGH были ниже у женщин, чем у мужчин. Однако эта разность достигла статистической значимости только после доз 5,0 и 20,0 мкг/кг rhGH (соответственно, P <0,05 и 0,0004). Уровни IGFBP-3 не модифицировались от доз 1,25 и 2,5 мкг/ кг rhGH. Дозы 5,0 мкг/кг rhGH увеличивали уровни IGFBP-3 у мужчин (P <0,05), но не у женщин, тогда как более высокие дозы rhGH также увеличивали уровни IGFBP -3 у обоих полов. Все дозы rhGH существенно не изменяли изначальные уровни ГР натощак (данные не сообщаются), атакже уровни глюкозы, инсулина, fT3 и fT4. Обсуждение результатов Результаты нашего исследования у здоровых людей показывают, что низкие дозы rhGH, эффективные для индуцирования увеличения уровней IGF-1 и IGFBP -3, составляют 2,5 и 5,0 мкг/кг, соответственно. Более того, эффект различных доз rhGH на уровень IGF-1 показывает четкую зависимость доза-ответ. Стимулирующее действие rhGH на уровни IGF-1 и IG-FBP-3 у испытуемых с нормальным здоровьем также ранее оценивалось и в других исследованиях, которые, однако, использовали две дозы rhGH значительно выше, чем те, которые используются в нашем случае. Действительно, минимальная доза rhGH, которую мы обнаружили, способна увеличить уровни IGF-1 у нормальных субъектов, на самом деле намного ниже, чем обычно предлагается для тестов IGF-1 поколения. Более того, самая низкая эффективная доза rhGH, вводимая в нашем исследовании, очень близка к ежедневной норме выработки ГР, оцениваемой у нормальных молодых людей. Таким образом, тестирование с этой дозой является основополагающим для проверки возможных изменений чувствительности к ГР печени в течение жизни и в различных патофизиологических условиях, таких как дефицит ГР, ожирение, недоедание, катаболические состояния, синдром Кушинга и расширенная кардиомиопатия. С другой стороны, доза ГР, необходимая для замены взрослых с тяжелым дефицитом ГР по-прежнему кажется очень низкой. Интересно, что наши данные показывают, что IGF-1 и IGFBP-3-ответ на rhGH зависят от пола; Такжесамая низкая эффективная доза rhGH выше у женщин, чем у мужчин. Это свидетельствует о том, что периферическая чувствительность к ГР у мужчин выше, чем у женщин. В соответствии с нашими данными недавно сообщалось, что у взрослых с GH-дефицитом увеличение IGF-1 во время хронического лечения ГР было выше у мужчин, чем у женщин. Существование зависимого от полового признака эффекта rhGH на синтез и высвобождение IGF-1 не вызывает удивления. На самом деле, хотя уровни основного IGF-1, как правило, являются сходными у обоих полов, спонтанная секреция ГР более 24 ч выше у молодых женщин, чем у мужчин. Число ГР-рецепторов, вероятно, не зависит от пола, о чем свидетельствуют доказательства того, что уровень связывания ГР-белка, маркер статуса ГР-рецептора, у мужчин и у женщин одинаковый. С другой стороны, имеются данные, свидетельствующие о том, что эстрадиол способен снижать уровни IGF-1, что, вероятно, нарушает механизмы пострецептора, лежащие в основе стимулирующего действия ГР на синтез и высвобождение IGF-1. Наши результаты также показывают, что IGFBP-3 менее чувствителен к стимуляции гормоном роста, чем IGF-1, в соответствии с предыдущими результатами исследований среди взрослых с ГР-дефицитом. На самом деле синтез и высвобождение IGFBP-3 зависят от ГР, но, вероятно, также и от IGF-1. Это также может объяснить, почему время реакции IGFBP-3 дольше относительно времени IGF-1. Доказательства того, что IGFBP -3 менее чувствителен, чем IGF-1 к стимуляции rhGH, подразумевает, что для исследования секреторного статуса ГР и контроля адекватности GH-терапии в GH-дефицита упациентов анализ IGF-1 более надежен, чем анализ IGFBP-3; Заметим также, что IGF-I больше, чем IGFBP -3 отражает статус ГР у пациентов с акромегалией. IGFBP-3 также менее чувствителен, чем IGF-1, к физиологическому увеличению и уменьшению секреции GH, которое происходит в период полового созревания и старения организма. Интересно, что доза rhGH, способная увеличивать уровни IGF-1, но не IGFBP-3, также приводит к увеличению отношения IGF-1 к IGFBP-3, что отражает увеличение свободного, биологически активного IGF-1. И наконец, несмотря на доказательства того, что хроническое лечение rhGH влияет на уровни инсулина и глюкозы, а также на степень конверсии тироксина - 3,5,3 "- трийодтиронина как у здоровых, так и у лиц с дефицитом ГР, мы не обнаружили никакого влияния на эти параметры. Это может быть связано с краткосрочным характером лечения, проведенным в нашем исследовании. Также это свидетельствует о том, что ранее выявленные эффекты при проводимых исследованиях сообщались исходя из высоких доз rhGH. В заключение, результаты настоящего исследования у нормальных молодых взрослых показывают, что реакции IGF-1 и IGFBP-3 на rhGH зависят от дозы и от пола. Более того, минимальная доза rhGH, способная увеличивать уровни IGF-1 и IGFBP-3, неожиданно низка, и IGFBP -3 менее чувствителен к стимуляции гормоном роста, чем IGF-1. Мы благодарим доктора J. Беллоне, Дж. Корнели и Дж. Рамунни за сотрудничество. Это исследование было проведено под эгидой Итальянского общества эндокринологии, Исследовательской группы по секреции гормона роста в течение периода жизни и было поддержано (40%) грантом 9706151106 от Ministry of Universita 'e Ricerca Scientifica Tecnologica. Получено 20 октября 1998 года; Принятый в окончательном виде 23 февраля 1999 года.
